高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染是引发宫颈癌的重要原因之一。据WHO报道，全世界每年约有50万宫颈癌新发病例，每天有600名妇女死于宫颈癌，其中80%在发展中国家[1]。乐昌市位于广东北部，是粤、湘、桂、赣四省(区)交汇中心，素有“广东北大门”之称，全市总面积2421平方公里，总人口54万人。本研究对全市10个乡镇进行了随机抽样调查，采集了5 380例农村育龄妇女的宫颈脱落细胞，进行HPV-DNA和新柏氏液基细胞学技术(thinprep cytologic test，TCT)检查，了解乐昌市农村育龄妇女HPV感染与宫颈癌筛查的现状，为预防宫颈癌提供有效的决策依据。
对象与方法
1.对象：2011年1月—2013年1月系统随机抽取乐昌市10个乡镇的农村育龄妇女5 380例，约占全市人口的1%。农村户籍4 952例，城镇户籍428例；年龄30～38岁，平均(32.5±2.0)岁；均无急性生殖道感染史，无宫颈锥切和子宫切除史，近半年内未使用过性激素，无妊娠史，于月经干净后3～7 d采集标本，采集标本日前1周无性生活史。
2.样本采集方法：在乡镇计生服务所或计划生育流动服务车内，按照无菌规范操作由医生以窥阴器暴露宫颈，擦净宫颈口分泌物，用特制的宫颈刷收集宫颈口及宫颈管的脱落上皮细胞，并将毛刷头部放入盛有细胞保存液的小瓶内保存送检。
3.HPV-DNA检测方法：将采集的样本送广州金域医学检验中心，应用原位杂交法检测23种不同亚型HPV，包括HPV6、11、16、18、31、33、35、39、 42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、69、73和82。
4.TCT检测方法：将采集的样本送广州金域医学检验中心，将收集到的宫颈脱落细胞洗入含Thin prep的保存瓶中，经Thin prep2000系统处理，分离标本中的黏液、血液、炎细胞与上皮细胞，制成直径2
的薄层细胞涂片，95%酒精固定，巴氏染色，镜检，以TBS分级系统进行细胞学诊断。
5.细胞学诊断标准：按照国际通行的TBS分类[2]，(1)正常范围内(WNL)包括可能伴随炎症或良性反应性改变；(2)非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)；(3)低度鳞状上皮内病变(LSIL)；(4)高度鳞状上皮内病变(HSIL)；(5)鳞状细胞癌(SCC)。ASC-US及以上视为细胞学检测阳性。
6.统计学处理：应用SPSS 19.0进行统计学软件进行分析，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
结果
1.HPV感染状况：HPV-DNA检出阳性率8.1%(437/5 380)，检出HPV6、11、16、18、33、35、51型分别为1.4%(76/5 380)、0.8%(43/5 380)、3.4%(183/5 380)、1.6%(87/5 380)、0.4%(21/5 380)、0.3%(14/5 380)、0.2%(13/5 380)。
2.宫颈脱落细胞学检测:WNL为96.6%(5 196/5 380)，ASCUS为2.5%(134/5 380)，LSIL为0.7%(37/5 380)，HSIL为0.2%(11/5 380)，SCC为0.4‰(2/5 380)；细胞学检测总阳性率为3.4%(184/5 380)。
3.HPV感染状况与细胞学检测结果的关系：HPV阳性者与宫颈脱落细胞阳性者年龄、文化程度和月收入比较，差异无统计学意义，见表1；WNL、ASCUS、LSIL、HSIL及SCC患者HPV阳性率分别为6.2%(322/5 196)，59.0%(79/134)，67.6%(25/37)，81.8%(9/11)，100.0%(2/2)，随细胞学病变程度的加重，HPV感染阳性率升高(r=0.672，P<0.001)。
表1HPV阳性者与宫颈脱落细胞阳性者的一般特征比较
讨论
1.HPV的感染现状：国外学者认为HPV感染非常普遍，人群感染阳性率可达20%～46%[3-4]。HPV在中国的人群感染率存在一定的地区差异，广东省流动人口整体感染率为6.8%[5]，广州地区为7.9%[6]，东莞地区为9.2%[7]，唐山地区为18.9%[8]。本研究对乐昌市10个乡镇的5 380例农村育龄妇女的宫颈脱落细胞进行HPV-DNA检测，HPV感染阳性率为8.1%，与国内相临近地区接近。乐昌市农村育龄妇女的HPV感染类型主要以HPV6、11、16、18、33、35、51 型为主，其中HPV16和HPV18两种类型的感染阳性率居前两位，与全球范围内的HPV感染类型一致[9]，但感染的其他类别比较单一，与国内外学者的结果存在一定的差异，这可能与乐昌市所处的地理位置有一定的关系，乐昌市地处广东北部山区，交通欠发达，人口流动性不大，以客家人聚居为主，有效地控制了HPV的感染范围。因此,HPV感染亚型的分布存在一定的地域性差异，做好HPV感染型别的筛查，可为预防HPV感染提供有效的科学依据和参考。
2.HPV感染与宫颈癌的关系：自ZurHause提出HPV感染可导致宫颈癌发生的假设以来，越来越多的研究证明HPV与宫颈癌的发生关系密切。到目前为止，全世界大量的流行病学调查和实验室研究数据均证实，HPV感染是宫颈癌发生的主要病因之一。HPV感染在宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)I患者中达70%～78%的阳性率，在CIN II或CIN III中可达80%～89%，而在宫颈癌患者中可超过95%[10-11]。吴晓箐等[6]也认为宫颈病变越严重，HPV检出阳性率越高，HPV感染的危险度越大。本筛查也发现，随细胞学病变程度的加重，HPV感染的阳性率升高。
在后续研究中，将对HPV阳性及细胞学阳性者进行5年紧密的随访，了解患者发病情况。HPV感染可能是宫颈癌发生的必要条件，建议加大对乐昌市广大育龄妇女卫生保健知识的宣传，加强对广大育龄妇女生殖健康意识的培养，鼓励她们定期到正规的医疗服务机构做好HPV的筛查和宫颈脱落细胞的检查，早防早治，根据影响HPV感染的相关因素及分布特点，从根本上阻断HPV的传染，从而预防HPV感染，防止宫颈癌的发生。
参考文献
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6 吴晓箐,谈军,李优云,等.广州市白云区流动人日育龄妇女HPV感染及宫颈病变的流行病学调查.中国计划生育和妇产科,2013,5:22-25.
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8 韩秀玲,李世辉,宋忱,等.唐山地区育龄妇女人乳头瘤病毒感染状况分析.广东医学,2011,32:875-876.
9 De Sanjose S,Quint WG,Alemany L,et al.Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer:a retrospective cross-sectional worldwide study.Lancet Oncol,2010,11:1048-1056.
10 Cuzick J，Bergeron C,von Knebel Doeberitz M,et al.New tecbnologies and procedures for cervical Cancer screening.Vaccine,2012,20:F107-Fl16.
11 Castle PE,Gravitt PE,Wentzensen N,et al.A descriptive analysis of prevalent vs incident cervical intraepithelial neoplasia grade 3 following minor cytologic abnormalities.Am J Clin Pathol,2012,138:241-246.