目前认为，免疫反应及细胞因子在肺炎支原体肺炎(MPP)的发生及发展过程中发挥着十分重要的作用[1]。白细胞介素-15(IL-15)是新近发现的一种细胞因子，具有十分广泛的生物学特性，具有较强的免疫调节功能。有研究表明，该因子可能与过敏性疾病的发生、发展存在一定的关联性[2]。肺炎支原体肺炎的主要发病机制为T淋巴细胞的大量激活，特别是Th淋巴细胞的数量及功能紊乱等方面存在一定的关系 。临床试验研究表明，肺炎支原体(MP)具有感染源及过敏源两重身份，机体受感染后则会导致体液免疫及细胞免疫功能受损，从而诱发及加剧支气管炎的发作[3]。神经营养因子属于一类具有相似受体以及生理活性的同源蛋白质，主要包括神经生长因子(NGF)、脑原性神经营养因子及神经营养因子-3、4、5等。上述各种因子在中枢神经系统的发育过程中对神经元的生长分化及维持神经元的正常功能具有十分重要的作用与意义。新近研究发现，肺炎支原体肺炎及其他致敏性疾病的发生、发展可能同NGF具有较为紧密的联系[4]。本研究主要探讨了重症肺炎支原体肺炎患儿血清NGF和IL-15的水平变化情况，现报道如下。
对象与方法
1.对象：收集2010年11月—2013年11月入住本院的133例肺炎支原体肺炎患儿的临床资料，男79例，女54例；年龄3～12岁，平均(7.9±1.4)岁；临床表现有发热、刺激性干咳、喘息、肺部啰音及肺外表现分别为25.6%(34/133)、17.3%(23/133)、24.1%(32/133)，25.6%(34/133)，7.5%(10/133)；重症组78例，男51例，女27例；年龄3～11岁，平均(8.1±1.5)岁；轻症组55例，男28例，女27例；年龄3～12岁，平均(7.9±1.2)岁。选择同期于本院进行体检的健康者52例作为对照组，男34例，女18例；年龄3～11岁，平均(7.6±1.2)岁。3组性别、年龄比较，差异均无统计学意义。
2.纳入标准：临床诊断标准参考《小儿内科学》(第3版)中关于MPP的临床诊断标准[5]。(1)不规则发热症状，咳嗽严重，呼吸困难且较轻，中毒症状相对较轻；(2)双肺呼吸音较粗，且会出现肺部湿罗音或肺部实变体征等；(3)胸片可表现为支气管炎、间质性肺炎、大叶性肺炎改变等；(4)采用微量颗粒凝集法对血清中MP-IgM抗体(1:40倍稀释)进行检测，结果为阳性(+)。均自愿参加，并签署知情同意书。
3.排除标准[6]：(1)并发其他感染性疾病，包括皮肤、泌尿系以及消化系等部位的感染疾病；(2)并发肺结核及支气管哮喘等其他呼吸系统疾病；(3)免疫功能低下、并发其他免疫性及过敏性疾病；(4)不能自愿，未签署知情同意书者。
4.MPP分期标准：急性期为发病1周之内，未经大环内酯类抗生素、免疫添加剂及糖皮质激素等治疗；恢复期为发病2～3周，患者临床症状及体征均呈显著缓解状态，经胸部X线检查显示，患儿病灶被明显吸收或者消失等。出现以下情况之一者诊断为重症MPP(1)症状重，肺部病变进展快，肺大叶实变；(2)单用大环内酯类抗生素治疗效果不佳，参照《诸福棠实用儿科学》的诊断标准[7]。
5.相关指标检测方法：(1)试剂。IL-15酶联免疫吸附试剂盒、NGF酶联免疫吸附试剂盒。(2)标本采集。MPP急性期于入院第2天清晨采集其空腹状态下的静脉血，MPP恢复期于清晨空腹状态下采集静脉血，均为2.0 ml，于3 000 rpm的转速下对其进行离心10 min，取血清，于-80 ℃温度条件下保存，待测。健康对照组标本采集也采用上述方法，采集时间为体检当天。(3)检测方法。采用ELISA法对上述所采血清中的NGF及IL-15的水平进行检测、分析，操作严格按照试剂盒上的说明进行。
6.观察指标：比较3组NGF与IL-15水平、MPP重症组急性期及恢复期与健康对照组NGF及IL-15水平、MPP重症组与轻症组急性期及恢复期NGF及IL-15水平。
7.统计学处理：采用SPSS 18.0软件对数据进行处理，计量资料以
表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
结果
重症组血清NGF与IL-15水平高于轻症组及对照组，轻症组血清NGF与IL-15水平高于对照组；重症组急性期血清NGF及IL-15水平高于恢复期与对照组；MPP重症组急性期、恢复期NGF及IL-15水平分别高于MPP轻症组急性期、恢复期；差异均有统计学意义，见表1。
讨论
MP是引发小儿呼吸道疾病及肺外病变较为常见的一种胞内病原体，其发病率呈现出逐年上升的发展趋势。MP感染与儿童支原体肺炎之间的关系日益引起了人们的广泛关注与重视。国内研究表明，急性呼吸道MP感染是患儿出现支原体肺炎的一个重要因素[8]。国外的研究结果显示，MP感染后肺炎支原体患儿外周血Th1/Th2失衡，以Th2反应为主[9]。本课题组既往对MP的临床研究发现，MP感染后T淋巴细胞被大量激活，Th淋巴细胞表面CD40L的表达水平显著上升，表面MP感染后T淋巴细胞激活异常增多，且经过CD40-CD40L之间的相互作用促进B淋巴细胞活化及抗体类型转变，使得各种抗体如IgE的生成量明显增大，从而诱导肺炎支原体肺炎的发展及疾病的加剧[10]。本研究显示，重症组血清IL-15水平高于轻症组及对照组，重症组急性期血清IL-15水平高于恢复期与健康对照组，MPP重症组急性期及恢复期IL-15水平高于轻症组急性期及恢复期。MP作为一种胞内菌感染后机体外周血IL-15水平反应性显著上升，原因可能是先通过活化细胞毒性T淋巴细胞与NK细胞来参与对MP免疫过程的清除，但是IL-15水平异常上升的同时，还诱导了记忆T淋巴细胞的增殖及活化等，后者可合成及分泌大量的IL-4，从而使得CD4+T淋巴细胞向Th2淋巴细胞转化，且会分泌更多的Th2样细胞因子，如IL-4与IL-5等因子，而这些因子会刺激B淋巴细胞产生IgE，且促使嗜酸性粒细胞的分化、增殖及向呼吸道浸润等，从而导致肺炎支原体肺炎的发生。本研究提示，血清IL-15水平越高，肺炎支原体肺炎病情越严重。
表13组血清NGF、IL-15水平比较
注：与对照组比较，*P<0.05；与轻症组比较，△P<0.05；与重症组恢复期比较，#P<0.05；与轻症组急性期比较，▲P<0.05；与轻症组恢复期比较，☆P<0.05
陈允芝等[11]、周四芳等[12]研究表明，NGF是神经源性炎症反应的一项十分重要的介质，在大多数过敏性疾病的发生发展过程中扮演着非常重要的角色。肺炎支原体肺炎的病理特征就是气道呈现出多种炎性细胞浸润及气道反应性。虽然临床上一般认为，气道炎症可引起气道高反应性，但目前对二者之间的关系尚未完全明晰。目前，雷中劲等[13]研究表明，NGF在肺炎支原体肺炎的发生、发展及维持之中发挥重要作用，肺炎支原体肺炎大鼠支气管肺泡灌洗液中的NGF水平与气道炎性指标存在紧密的关系，主要表现为BALF中的NGF水平越多，嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润数量也就越多，从而使得肺组织中的IL-4 mRNA水平的高表达；在阻断内源性NGF肺炎支原体肺炎模型的BALF中嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的浸润数量减少，BALF中的IL-4水平显著降低，肺部组织中的IL-4 mRNA的表达水平也显著降低。进一步说明了NGF与肺炎支原体肺炎的发生、发展存在较为紧密的联系。本研究显示，重症组血清NGF水平高于轻症组及对照组，重症组急性期血清NGF水平高于恢复期与对照组，MPP重症组急性期及恢复期NGF水平高于轻症组急性期及恢复期，与Shi等[14]和Liu等[15]的研究结果一致。
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