多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是最常见的妇科内分泌疾病，在围绝经期妇女可出现Ⅱ型糖尿病、高脂血症、心血管疾病等，严重危害妇女的生殖生理健康。PCOS是一个异质性的内分泌疾病，病因未完全明了，其发病机理尚无明确的解释。目前，多数研究认为是代谢异常和内分泌紊乱性的异质性疾病，人们已对PCOS的下丘脑-垂体-性腺轴功能失调，糖代谢异常，血脂异常，肥胖及遗传因素等方面进行了大量的研究。PCOS患者常伴有胰岛素敏感度下降30%～40%，与Ⅱ型糖尿病相似[1]。PCOS患者的远期并发症表现为糖尿病和心血管异常，高血压的发病率比正常人增加3倍，绝经后40%的PCOS患者有糖耐量异常[2]。目前，认为胰岛素抵抗和动脉粥样硬化是一种慢性炎症的紊乱，慢性炎症因子可以预测PCOS患者患Ⅱ型糖尿病的危险性[3]。本文收集大样本PCOS患者(LH/FSH≥2)研究外周血中白细胞分布及炎症因子的变化，探索高LH型PCOS的外周血白细胞的变化。
对象与方法
1.对象及检测指标：收集2011年7月1日至2014年5月30日在广东省珠海市妇幼保健院生殖中心就诊的三个月内未行二甲双胍或达英-35治疗且LH/FSH≥2的PCOS患者46例作为PCOS组，选择同时期临床上由于男方不孕而进行试管婴儿治疗的55例正常妇女作为对照组。PCOS的诊断参照鹿特丹标准[4]，两组年龄均在20～40岁，平均年龄(31.03±3.42)岁，记录身高与体重，在月经第三天抽取30 ml血液作为标本，并用肝素抗凝，检测血浆中卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)、CRP、血常规。
2.实验方法：采用化学微粒子酶联免疫发光法检测FSH、LH、T。采用美国Beckman Coulter AC.T 5diff血细胞分析仪测得外周白细胞计数及其百分比。血浆CRP测定试剂盒由芬兰Orion公司提供,采用免疫透射比浊法检测。
3.统计学处理：使用统计学软件SAS8.1，两样本计数的比较进行t检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。
结果
1.高LH型PCOS患者与正常妇女外周血白细胞计数分析：根据日本妇产学会对PCOS的诊断，对我国PCOS临床特征的报道和一些相关研究[5]，LH/FSH≥2可以作为PCOS的一个辅助诊断标准，LH/FSH≥2表明PCOS体内LH偏高，可以作为高LH型PCOS的评判标准。PCOS组患者与对照组正常妇女比较，淋巴细胞数目明显升高，CRP比正常妇女组明显升高，差异有统计学意义；外周血白细胞总数、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞两组无明显差异。见表1。
2.PCOS外周血淋巴细胞与BMI、LH/FSH比值的多重相关分析：多重方程式 Y=0.0714*X1+0.0132*X2+1.7302，其中Y=淋巴细胞数，X1=LH/FSH，X2=BMI，
多重回归的假设检验为P=0.046，淋巴细胞数与BMI无相关(P=0.553)，与LH/FSH呈正相关(P=0.037)，但是淋巴细胞数主要受LH/FSH比值的影响。
表1 高LH型PCOS患者(LH/FSH≥2)与正常妇女白细胞计数和血脂代谢比较
注：*P <0.05
讨论
根据主要发病机理及临床表现，把PCOS分为两种类型：下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱型和胰岛素抵抗型。两种类型在全世界的分布不一致。下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱型主要表现为LH升高。南亚PCOS患者主要以胰岛素抵抗为主[6]，日本PCOS患者则以下丘脑垂体紊乱型为主[7]，中国人PCOS临床特征与日本类似。研究证实慢性炎症与糖尿病存在密切的关系，但是慢性炎症与PCOS和胰岛素抵抗的关系存在争议，尚未见下丘脑垂体卵巢轴抵抗型PCOS和LH与慢性炎症的关系报道。
PCOS患者血中CRP等炎症因子明显升高，炎症反应主要受BMI影响[8]，而白细胞计数不受体内的激素如LH的影响[9]。本文中PCOS组(LH/FSH≥2)与正常组相比在白细胞总数上没有区别，但是白细胞亚类中淋巴细胞数目明显高于对照组。多重回归分析中淋巴细胞与BMI无相关，与LH/FSH比值呈正相关，但是淋巴细胞数目受LH/FSH比值的影响大于BMI。
在去势的动物中LH升高，胸腺体积增大，胸腺细胞增殖，外周血淋巴细胞增多[10]。雌性大鼠使用GnRH拮抗剂阻断GnRH受体，可以抑制淋巴细胞的增殖，降低淋巴细胞的数目，降低胸腺和淋巴结的体积及淋巴细胞的数目[11]。肌注雌二醇的小鼠脾脏和胸腺内CD8+淋巴细胞明显减少[12]。体外的实验也证明LH可以刺激淋巴细胞的增殖[13]，因此对于下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱型PCOS，高LH可能促进胸腺和淋巴结的增生，增加淋巴细胞的数目。
T淋巴细胞是一种主要的慢性炎症细胞，可分泌产生淋巴因子、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、IL-6这些炎症介质，可以激活巨噬细胞，巨噬细胞产生的细胞因子反过来也可以激活淋巴细胞，巨噬细胞和淋巴细胞分泌TNF-α、IL-6，诱导机体产生胰岛素抵抗。因此，淋巴细胞的增多可能是下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱PCOS胰岛素抵抗的启动因素[14]。PCOS中高LH可能通过刺激胸腺，淋巴结中淋巴细胞的增殖，增加外周血中淋巴细胞的数目，从而导致慢性炎症和胰岛素抵抗。
淋巴细胞是卵巢组织中主要的免疫细胞。PCOS妇女外周血中淋巴细胞明显升高，卵巢内T淋巴细胞明显浸润[15]。淋巴细胞可以易化细胞因子的细胞毒作用，诱导和激活巨噬细胞。淋巴细胞和巨噬细胞分泌大量的细胞因子 [16]，这些细胞因子诱导卵泡颗粒细胞的凋亡。卵泡细胞凋亡，特别是颗粒细胞的凋亡，导致卵泡闭锁，巨噬细胞有很强吞噬作用，可以吞噬凋亡的卵泡细胞[17]。因此PCOS患者卵巢局部淋巴细胞的升高可能通过各种细胞因子作用于卵泡的膜细胞和颗粒细胞，诱导细胞的凋亡，从而使PCOS患者无法形成主导卵泡。
综上所述，PCOS患者(LH/FSH≥2)和正常体重的妇女外周血中CRP增高，淋巴细胞明显升高。LH可能通过刺激淋巴细胞的增殖，使高LH型PCOS患者产生异常的慢性炎症反应。
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