子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是常见于育龄期妇女的一种慢性疾病，病理特征为子宫内膜样组织在子宫外其他部位出现，具有侵袭能力强大、治疗后复发率高等特点，对患者生育功能及生活质量均造成不利影响。此疾病目前发病机制仍未研究清晰，其发生、发展过程与新生血管组织形成、炎性感染反应、免疫系统功能紊乱等有一定相关性。巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MMIF)是一种多功能的细胞因子，主要限制巨噬细胞的移动和增加病灶内巨噬细胞的浓度，促进巨噬细胞分泌多种细胞因子，促进局部的炎症反应[1]。糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)是目前最常用的卵巢上皮样肿瘤标志物，在盆腔感染性疾病、子宫肌瘤、妊娠等时出现升高[2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有诱导内皮细胞增殖、增加血管通透性的生理活性，在子宫新生血管形成过程中发挥重要作用[3]。近些年的研究发现EMs患者血清MMIF、CA125及VEGF表达水平与正常育龄期妇女比较存在显著差异性，因此，本文拟观察其在EMs患者血清中的表达，并探讨其临床意义。
资料与方法
1.临床资料：选择本院妇产科2014年2月至2016年10月期间住院行腹腔镜治疗的60例EMs患者作为研究对象(EMs组)，经病理组织检查均已确诊，且除外合并有子宫其他疾病，心肝肾等重要脏器功能障碍、近期使用激素类药物治疗及严重炎症感染反应者。EMs患者平均年龄为(34.2±7.5)岁，体重指数(BMI)为(24.4±4.2) kg/m2，月经周期为(28.2±3.4) d；同期选择40例门诊健康体检的育龄期妇女作为对照组，平均年龄为(33.8±7.1)岁，BMI为(24.5±4.0) kg/m2，月经周期为(28.3±3.5) d。两组在性别、BMI、月经周期等方面比较差异无统计学意义，所有患者及健康体检者均签署知情同意书，本研究方案已通过本院伦理委员会批准。
2.分组：根据美国生殖协会分期标准(R-AFS)[4]将60例EMs患者分为Ⅰ期(n=15例)、Ⅱ期(n=16例)、Ⅲ期(n=16例)和Ⅳ期(n=13例)；根据痛经评分标准[5]分为轻度(10～14分，n=18例)、中度(16～24分，n=21例)和重度(26～30分，n=21例)。
3.血清MMIF、CA125及VEGF表达水平检测：所有EMs患者入院后第1天清晨，健康体检者则在门诊体检时，抽取肘外周静脉血液5 ml，在3 500 r/min离心机转速下离心处理10 min，吸取上层血清置于-20℃冰箱中留存待测，采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组血清MMIF、CA125及VEGF表达水平，试剂盒购自北京中山生物技术有限公司，由专人根据试剂盒说明书步骤进行检测。
4.统计学处理：数据均采用SPSS16.0统计学软件予以分析，计量资料以均数±标准差表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验，检验水准α=0.05。
结果
1.两组血清MMIF、CA125及VEGF表达水平比较：EMs组血清MMIF、CA125及VEGF表达水平均明显高于对照组，组间差异有统计学意义。见表1。
表1两组血清MMIF、CA125及VEGF表达水平比较
注：与对照组比较，*P<0.05
2.EMs组不同R-AFS分期血清MMIF、CA125及VEGF表达水平比较：随着R-AFS分期逐渐升高，EMs组血清MMIF、CA125及VEGF表达水平呈逐渐升高趋势(P<0.05)，见表2。
表2EMs组不同R-AFS分期血清MMIF、CA125及VEGF表达水平比较
注：与Ⅰ期比较，*P<0.05；与Ⅱ期比较，#P<0.05；与Ⅲ期比较，△P<0.05
3.EMs组不同痛经严重程度血清MMIF、CA125及VEGF表达水平比较：随着痛经严重程度逐渐加重，EMs组血清MMIF、CA125及VEGF表达水平呈明显升高趋势(P<0.05)，见表3。
表3EMs组不同痛经严重程度血清MMIF、CA125及VEGF表达水平比较
注：与轻度比较，*P<0.05；与中度比较，#P<0.05。
讨论
目前，多数研究人员认为，EMs主要是子宫内膜样组织和间质细胞随着血液循环系统出现逆流现象，进而种植在卵巢或附件的盆腔腹膜组织上，并呈逐渐蔓延性增殖生长[6]。这些异位生长的子宫内膜组织可刺激作用于腹膜组织，进而导致巨噬细胞生物活性功能显著性增强，大量合成和释放炎症细胞因子，而MMIF为其中重要的细胞因子[7]。相关研究发现[8]，MMIF可明显增强基质金属蛋白酶分解细胞外基质的生理学功能，进而有助于子宫内膜细胞顺利的侵袭和定植生长。还有研究证实[9]，MMIF可明显增强血管组织生长相关基因的表达水平，进而显著性促进新生血管组织的形成，此外还可抑制p53基因的表达水平，进而起到阻止异位子宫内膜细胞发生凋亡。
CA125则是一种糖蛋白表面抗原，主要分布于各种膜间皮细胞、苗氏管表面及妇科肿瘤细胞中，在血清中可检测出较高水平表达[4]。血清CA125表达水平显著性升高，主要为富含CA125组织出现异常增殖及生长所引起，临床上常作为诊断妇科肿瘤的实验室指标。近些年研究发现[5]，EMs血清CA125表达水平明显高于正常育龄期妇女，在诊断EMs方面也具有一定的价值。
异位子宫内膜组织出现黏附和侵袭等恶性行为与新生血管组织形成之间存在密切的联系，而VEGF是目前已知生物学功能最强大的促血管形成细胞因子，可显著性增强微血管组织的通透性程度，进而诱导血管内皮细胞和新生血管组织的形成[10]。近些年研究证实[11]，EMs患者血清及内膜组织中VEGF表达水平显著性升高，后者可有效促进异位内膜病灶组织中新生血管形成，进而呈充血病理状态，最终出现月经量过多，腹部疼痛不适等临床症状及体征。
本研究显示，EMs组患者不但血清MMIF、CA125及VEGF表达水平明显高于对照组(P<0.05)，且其表达水平与R-AFS分期升高和痛经严重程度加重有关，呈明显升高趋势。由此可知，血清MMIF、CA125及VEGF表达水平可作为EMs诊断、分期及痛经严重程度评估的实验室指标。本研究不足之处在于病例数相对较少，还需将来增加大样本量深入研究以探讨其作用机制。
参考文献
1 Veillat V,Sengers V,Metz CN,et al.Macrophage migration inhibitory factor is involved in a positive feedback loop increasing aromatase expression in endometriosis.Am J Pathol,2012,181:917-927.
2 Yang H,Lang JH,Zhu L,et al.Diagnostic value of the neutrophiltolymphocyte ratio and the combination of serum CA-125 for stages Ⅲ and Ⅳ endometriosis.Chin Med J (Engl),2013,126:2011-2014.
3 Xu H,Zhang T,Man GC,et al.Vascular endothelial growth factor C is increased in endometrium and promotes endothelial functions,vascular permeability and angiogenesis and growth of endometriosis.Angiogenesis,2013,16:541-551.
4 俞丹华.巨噬细胞移动抑制因子、血管生成素-2、血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的意义.临床和实验医学杂志,2015,14:101-103.
5 王菲，崔宏伟.子宫内膜异位症患者血清和腹腔液CA-125抗原、血管内皮生长因子水平的相关性研究.中国医师进修杂志,2015,38:664-667.
6 Stilley JA,Birt JA,Sharpe-Timms KL.Cellular and molecular basis for endometriosis-associated infertility.Cell Tissue Res,2012,349:849-862.
7 Mei J,Xie XX,Li MQ,et al.Indoleamine 2,3-dioxygenase-1 (IDO1) in human endometrial stromal cells induces macrophage tolerance through interleukin-33 in the progression of endometriosis.Int J Clin Exp Pathol,2014,7:2743-2757.
8 Pan X,Mao X,Cheng T,et al.Macrophage migrationinhibitiory factor:a regular of MMP13 and inflammation in titanium particles stimulated air pouch in vivo.Mol Cell Biochem,2011,357:313-321.
9 杨剑，陈景伟，赵静，等.子宫内膜异位症患者腹腔液中血管内皮生长因子、卵巢癌抗原水平的变化及临床意义.解放军医药杂志,2012,24:14-17.
10 Li YZ,Wang LJ,Li X,et al.Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms contribute to the risk of endometriosis:an updated systematic review and meta-analysis of 14 case-control studies.Genet Mol Res,2013,12:1035-1044.
11 陆丹,贺青蓉,秦炜,等.组织因子和血管内皮生长因子在子宫内膜异位症组织中的表达及意义.广东医学,2015,36:1863-1865.