解脲脲原体(ureaplasma urealyticum，Uu)在女性下生殖道具有一定的致病性，前期在动物实验中已经证实[1]。临床上Uu与不育不孕症和不良妊娠结局之间也密切相关[2-4]，在不孕症患者群体中也是高检出率[5-6]。目前，临床上用于Uu感染的抗生素主要有四环素类、大环内脂类和喹诺酮类三大类药物，多数不孕不育患者如果检测到Uu感染，会主动或被动接受抗生素的治疗，但是长期不合理或不规范应用抗生素治疗Uu感染，可能会诱导Uu对临床常见抗生素产生不同程度耐药性。因此，分析不孕不育患者群体中Uu对抗生素的临床药敏结果，不仅可以指导临床合理、规范使用抗生素，也有利于优生优育和二孩政策的落实。
材料与方法
一、临床资料
回顾分析2007—2018年本院不孕不育科(生殖中心)6 516例诊断为不孕不育症并送皮肤性病科性病实验室的患者的Uu临床药敏结果，标本均取自患者泌尿生殖道，其中男性2 090例(32.1%)，年龄22～56岁；女性4 426例(67.9%)，年龄20～46岁。
二、方法
1.标本与试剂：所有临床标本按常规取材、送检。Uu培养、鉴定和药敏试剂均采用珠海丽珠试剂股份有限公司提供的“解脲脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试剂盒”进行Uu培养、鉴定和药物敏感性试验，该试剂盒同步测定Uu对米诺环素(minocycline，MIN)、多西环素(doxycycline，DOX)、红霉素(erythromycin，ERY)、阿奇霉素(azithromycin，AZI)、克拉霉素(clarithromycin，CLA)、罗红霉素(roxithromycin，ROX)、环丙沙星(ciprofloxacin，CIP)、司帕沙星(sparfloxacin，SPA)和左氧氟沙星(levofloxacin，LEV)9种抗生素的敏感性。试剂盒由选择性液体培养基和含有24个微孔的试剂条组成。1～2号微孔是质控部分，3～6号微孔是鉴定与半定量计数部分，7～24号是药物敏感性试验部分。
2.检验方法：取出所需数量的液体培养基，平衡至室温，摇匀。将50μl培养基加入C-空白孔中。将无菌拭子采集的分泌物标本插入培养基中，挤压旋转拭子数次，使拭子中标本渗入，弃拭子。充分混匀接种了标本的液体培养基，用加样器分别准确量取50μl接种到试剂条余下各孔中(除外C-孔)。然后往试剂条的每一孔中滴加一滴石蜡油，并盖上盖子。将剩余培养基连同试剂条一起置35℃～37℃隔水恒温培养箱中培养，分别于24 h和48 h观察结果。
3.药敏结果判定：当指示孔变色，2个药物微孔48 h不变色，提示敏感(S)；2个药物微孔均变红，提示耐药(R)；低浓度孔变红、高浓度不变则提示中介(I)。
敏感率=敏感菌株数/菌株总数×100%
中介率=中介菌株数/菌株总数×100%
耐药率=耐药菌株数/菌株总数×100%
结 果
6 516例不孕不育患者泌尿生殖道分离的Uu临床株对MIN、DOX、ERY、AZI、CLA、ROX、CIP、SPA、LEV 9种抗生素的临床药敏结果见表1，其敏感率、中介率和耐药率之间的比较见图1、图2和图3。
由表1和图1、2、3可知，从敏感率角度，Uu临床株DOX、MIN、CLA和AZI占据敏感率前四位，分别为DOX(男性95.6%、女性93.5%)、MIN(男性95.4%、女性94.8%)、CLA(男性 89.5%、女性89.4%)和AZI(男性88.5%、女性88.1%)。从中介率角度，Uu临床株对LEV、SPA、ROX和ERY的中介率相对较高，分别为LEV(男性61.5%、女性61.1%)、SPA(男性47.9%、女性51.3%)、ROX(男性21.2%、女性42.6%)和ERY(男性24.4%、女性33.9%)。从耐药率角度，Uu临床株对CIP的耐药率(男性80.4%、女性71.9%)尤其突出。
表1 2007—2018年不育不孕患者Uu对9种抗生素药敏结果一览
Table 1 Antibiotic susceptibility of Ureaplasma urealyticum to nine antibiotics in patients with infertility, 2007-2018
AntibioticsSensitivityMaleFemaleIntermediaryMaleFemaleResistanceMaleFemaleSensitivityrate(%)MaleFemaleIntermediaryrate(%)MaleFemaleResistancerate(%)MaleFemaleMIN1994419728716815895.494.81.31.63.33.6DOX1998413615567723495.693.50.71.33.75.3ERY121916455091501362128058.337.224.433.917.328.9AZI185038973518520534488.588.11.74.29.87.8CLA18713958269119337789.589.41.22.19.28.5ROX14292113443188521842868.447.721.242.610.49.7CIP103353307890168031834.98.014.720.180.471.9SPA9941809100222709434747.640.947.951.34.57.8LEV69113841285270311433933.131.361.561.15.57.7
图1 2007—2018年不育不孕患者Uu对9种抗生素敏感率比较
Figure 1 Sensitivity rate of Ureaplasma urealyticum to nine antibiotics in patients with infertility by gender, 2007-2018
图2 2007—2018年不育不孕患者Uu对9种抗生素中介率比较
Figure 2 Intermediary rate of Ureaplasma urealyticum to nine antibiotics in patients with infertility by gender, 2007-2018
讨 论
Uu在不孕不育人群中的检出率因地区、时间不同而差异很大。Sleha等[7]报道111不孕症女性患者中，44例(39.6%)检出Uu。国内沈瑛红等[2]报道，在40例不孕不育症患者中，25例(62.5%)检出Uu；白玮等[8]报道457例女性不孕症Uu感染检测阳性率为50.0%，其相应男性配偶的Uu感染检测阳性率为48.3%。虽然检出率不一，但是均提示Uu与不孕不育有一定的相关性，而治疗不孕不育症合并的Uu感染，也是多数临床医生的选择之一。
图3 2007—2018年不育不孕患者Uu对9种抗生素耐药率比较
Figure 3 Resistance rate of Ureaplasma urealyticum to nine antibiotics in patients with infertility by gender, 2007-2018
目前临床上治疗泌尿生殖道的Uu感染，仍然限于喹诺酮类、大环内脂类和四环素类三大类药物，在不孕不育患者中亦存在不同程度的临床耐药性，而且耐药率和敏感率因地区、因时间不同而报道不一。国内刘思宇等[9]报道，200例不孕不育患者Uu的检出率是62.5%，相应药敏实验显示Uu对DOX、MIN和CLA高度敏感，敏感率分别为97.6%、96.8%和93.6%，而氧氟沙星(OFL)和ROX的耐药性强，耐药率分别为20.0%和10.4%。陈芳芬等[10]报道140例不孕症妇女中，Uu对四环素类抗菌药物有较高的敏感性，其次为氟喹诺酮类抗菌药物，而对红霉素类抗菌药物敏感性较低，对环丙沙星敏感性最低。国外对Uu的耐药率报道也不一，其中Maldonado-Arriaga等[11]报道不孕不育患者中Uu对DOX(100%)、CLA(93.3%)、AZI(86.6%)敏感，对CIP高度耐药(86.6%)；Foschi等[12]报道，Uu对喹诺酮类药物有明显的耐药性，尤其是CIP(77.0%)，其研究结果同时表明，MIN和DOX仍然是治疗Uu感染的一线药物。Skiljevic等[13]报道Uu对CLA(94.6%)、四环素(86.5%)、CIP(83.8%)和ERY(83.8%)均耐药。本研究结果提示，6 516例从不孕不育患者泌尿生殖道分离的Uu临床株对上述9种抗生素的临床药敏结果不一，其对各个抗生素之间敏感率和耐药率差异各有波动。
从敏感率角度，DOX、MIN、CLA和AZI占据敏感率前4位，也就是说，四环素类和大环内酯类抗生素是治疗不孕不育患者泌尿生殖道Uu感染的首选药物种类。从耐药率角度，CIP的耐药率尤其突出，提示近几十年随着喹诺酮类抗生素的广泛使用，包括临床各科室和养殖行业，Uu长期面临喹诺酮类抗生素的选择压力，比较经典的喹诺酮类抗生素如CIP的耐药率亦随之在高位波动。而从中介率角度，Uu对LEV、SPA、ROX和ERY的中介率相对较高。这提示，如果这4种抗生素继续不合理使用或滥用，Uu对这些抗生素的耐药率亦随之增加，反之，如果抗菌药物的合理使用能够得到落实或规范，Uu对这些抗生素的选择压力随之减少，耐药性亦可能会下降。
当不孕不育患者检出泌尿生殖道的Uu感染时，即使没有明显的临床症状或体征，医患双方的治疗意愿往往都比较强烈，部分患者甚至反复主动或被动治疗，不仅容易诱导Uu对临床常见抗生素的耐药，而且容易造成菌群失调、继发二重感染等，同时也造成有限的医疗资源被浪费，加重患者负担。所以，根据药敏结果规范化治疗不孕不育患者泌尿生殖道的Uu感染，具有现实的、迫切的意义。
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